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氨基液相色譜柱的柱溫改如何選擇呢
更新時(shí)間：2021-11-25 點(diǎn)擊次數：1169次
氨基液相色譜柱的系統由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動(dòng)時(shí)，經(jīng)過(guò)反復多次的吸附-解吸的分配過(guò)程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內流出，通過(guò)檢測器時(shí)，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來(lái)。
氨基液相色譜柱是高效液相分離系統的中重要的環(huán)節，業(yè)內常把色譜柱比喻為液相色譜的心臟，因為色譜柱的類(lèi)型決定了色譜系統的性質(zhì)，粒徑和長(cháng)度影響了分析時(shí)間和分析效率。氨基柱、苯基柱、氰基柱等正相色譜柱和C18、C8等反相色譜柱是藥物分析與評價(jià)工作中常見(jiàn)的兩類(lèi)色譜柱。
氨基液相色譜柱柱溫的選擇：
柱溫是影響色譜分離和分析效率的重要參數，所以要根據分析目的和被測物性質(zhì)，如：被測物的沸點(diǎn)、被測物極性、被測組分的多少，通過(guò)實(shí)驗優(yōu)化得到合適的柱溫。相對而言柱流失比較少，可以在較高溫度下工作。分析中通常采用程序升溫模式，從而提高分離度和柱效。
1、初始溫度的選擇：初溫的確定取決于譜圖上較早流出峰的分離度，一般應低于樣品中較低沸點(diǎn)組分的溫度；
2、升溫速率的選擇：升溫速率對色譜分離度和峰形的影響較大，對于多組分分析，可以設置多階、不同升溫速率的升溫程序，以得到較好的分離效果和峰形；
3、終點(diǎn)溫度的選擇：程序升溫溫度的確定主要取決于固定相和被測樣品中較高沸點(diǎn)的物質(zhì)。另外，對于基質(zhì)復雜的樣品，可以考慮在固定相規定較高溫度下適當提高溫度，并且在此溫度下適當延長(cháng)保持時(shí)間。
