聯(lián)系人：王經(jīng)理
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今天開(kāi)講之前，先給大家看一組九宮格圖，開(kāi)開(kāi)眼界~~
這是將色譜柱的入口端打開(kāi)后的樣子，也就是色譜柱中先接觸到樣品的填料。
正常的色譜柱入口端填料絕大多數應該是白白的、平整的，而這些是受到嚴重污染的色譜柱——變色、堵塞、雜質(zhì)蓄積......
OMG！
柱子造的都沒(méi)“柱”樣了！
那怎么辦？
如何避免色譜柱過(guò)早地“夭折”呢？
辦法還是有滴~~
通常，在分析柱前面，安裝一支保護柱就能大大減少損失。
那么，今天我們一起來(lái)學(xué)習一下，保護柱的重要性吧。
1、 為什么要使用保護柱？
2、 哪些樣品需要使用保護柱？
3、 保護柱會(huì )不會(huì )影響分離效果？
4、 如何選擇保護柱？
5、保護柱的使用及注意事項有哪些？
01
為什么使用保護柱呢？
樣品上機檢測前，一般會(huì )經(jīng)前處理去除雜質(zhì)，但是不能*避免，來(lái)自于樣品及色譜系統的微小的固體顆粒物、色素雜質(zhì)、未沉淀的蛋白等，可能會(huì )滯留在色譜柱中，從而導致色譜柱耐用性差、壽命縮短。
保護柱是安裝在分析柱之前的小柱，能起到分離凈化的作用，大大降低分析柱受污染的程度，延長(cháng)分析柱使用壽命，因此為您節省很多的耗材費用。
02
哪些樣品需要使用保護柱？
常規的液相色譜檢測中均需要使用保護柱，特別是對于食品、中藥、天然產(chǎn)物、合成中間體、復雜制劑及血漿等生物樣品的檢測，因待測基質(zhì)的復雜性，可能會(huì )導致色譜系統壓力升高、色譜柱堵塞、填料變色、測試結果不準確等各種影響。
03
保護柱會(huì )不會(huì )影響分離效果？
通常來(lái)講，理想的保護柱填料與分析柱填料一致，具有相同的選擇性，被測物基本上全被洗脫出來(lái)，不會(huì )影響待測物的響應值。
保護柱柱長(cháng)選擇恰當的話(huà)，不會(huì )產(chǎn)生峰擴散，也基本不會(huì )引起分離度的降低。
圖1 是安裝卡套式保護柱后的對比色譜圖，保留時(shí)間略微有延遲（原因是安裝了保護柱，色譜柱相當于長(cháng)了一點(diǎn)點(diǎn)）?？傮w來(lái)講，卡套式保護柱對分析結果基本無(wú)影響。
圖1
【液相條件】
色譜柱：CAPCELL PAK C18 MGIII-H S3; 2.0 mm i.d. x 100 mm
保護柱：CAPCELL PAK C18 MGIII-H S3; 2.1 mm i.d. x 5 mm
流動(dòng)相：60%乙腈
流 速：0.5 mL/min
溫 度：40℃
檢 測：UV 254 nm
樣 品：萘（峰4）
04
如何選擇保護柱？
1、保護柱與分析柱應具有相同填料、相同粒徑、相同內徑，以確保選擇性一致（同一個(gè)品牌）。
2、一般長(cháng)度為10mm的保護柱可以起到充分的保護作用，過(guò)長(cháng)的話(huà)可能會(huì )引起待測物的譜帶擴張。
3、盡量選擇可更換柱芯的的保護柱，柱芯價(jià)格相對便宜，易于使用和維護，而且死體積小。
4、如果是用于UHPLC柱，還要考慮一下保護柱的耐壓能力。
05
保護柱的使用及注意事項有哪些？
安裝
1、卡套式保護柱一般標注液流方向，請按照色譜柱標簽所示方向進(jìn)行安裝，盡量不要雙向混用。
2、卡套式保護柱可以更換柱芯，對于CAPCELL PAK 系列保護柱，即使柱芯內徑不同，只要柱芯的長(cháng)度相同，柱套既可通用。
3、保護柱與卡套組裝好后，請直接連接在色譜柱入口端。一般用手擰緊卡套即可，如有漏液發(fā)生，可再使用扳手擰緊30°，用力太過(guò)有可能導致壓環(huán)變形。
使用注意事項
1、專(zhuān)柱，避免保護柱成為不同項目的交叉污染源。
2、當色譜峰的理論塔板數下降，柱壓上升，或是關(guān)鍵分離度下降時(shí)，都應該及時(shí)更換保護柱。
3、不慎發(fā)生強污染時(shí)，可以將分析柱卸下，單獨沖洗保護柱，可以使污染物更快的從保護柱中流出。
4、保護柱或柱芯一般不建議超聲清洗，因可能對填料表面修飾有影響，當柱效下降時(shí)直接更換柱芯。
后，再給大家介紹2款靠譜的保護柱吧，一款是應用于HPLC的保護柱，另一款是應用于UHPLC的保護柱。
TIPs 知識擴展
1 CAPCELL PAK 卡套式保護柱 （應用于HPLC）
產(chǎn)品特點(diǎn)
1、應用于高效液相色譜，CAPCELL PAK 系列分析柱均有配套的保護柱。
2、CAPCELL PAK 保護柱，即使柱芯內徑不同，只要柱芯的長(cháng)度相同既可通用。
3、只對單價(jià)較低的柱芯進(jìn)行更換即可實(shí)現對分析柱的保護。
.2 CAPCELL EXP 卡套式保護柱 （應用于UHPLC）
產(chǎn)品特點(diǎn)
1、高耐壓 100 MPa，可用于超高效液相色譜。
2、幾乎無(wú)擴散，對分離的影響降低到極低限度。
3、可直接連接到色譜柱上，不會(huì )產(chǎn)生死體積的影響。
4、不需要工具，用手擰緊即可簡(jiǎn)便連接。
