氨基酸
氨基酸作為構成人體的蛋白質(zhì)的基本單元,同時(shí)也是生物機體所需要的重要營(yíng)養素。它們在機體內具有各自*的營(yíng)養功能,在代謝過(guò)程中又密切,共同參加、推動(dòng)和調節生命活動(dòng)。氨基酸分子中含有氨基和羧基及其他取代基團,因此氨基酸分子為極性水溶性分子,在反相色譜柱上保留較弱,無(wú)法直接進(jìn)行分析。
常用的分析方法有離子交換分離后直接或間接分析,但操作復雜,部分氨基酸無(wú)法分離導致結果準確度差,或者將氨基酸衍生后采用反相色譜法分離與紫外或熒光聯(lián)合分析,方法簡(jiǎn)單,但檢測靈敏度受衍生過(guò)程控制,且樣品基質(zhì)對分離效果影響較大。
石墨化碳柱(PGC)為新型的色譜柱填料,由于其具有特異的保留機理,可用于分離在反相色譜柱上無(wú)法保留的極性化合物,如氨基酸、碳水化合物等。本實(shí)驗采用石墨化碳柱直接分離氨基酸,采用蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)進(jìn)行定量分析來(lái)測定氨基酸的含量。
色譜條件:
色譜柱:Hypercarb 2.1×100mm,5 μm
(貨號:35005-102130)
流動(dòng)相:A:20mM 九氟戊酸(NFPA)(水溶液);B:CAN
流速:0.2mL/min
檢測器:ELSD(55℃,2.2Bar)
柱溫:10℃
結論
采用石墨化碳黑(PGC)色譜柱和ELSD檢測器無(wú)需衍生化操作即可直接分析22種氨基酸。
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